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談?wù)勈罂刽髑苟舅谹單克隆抗體的使用方法
更新時(shí)間:2022-10-10 點(diǎn)擊量:
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鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體
利用雜交瘤技術(shù)制備,將具有此特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,從根本上解決了抗體制備中長期存在的特異性和重復(fù)性問題,可直接用于疾病診斷、預(yù)防、治療和免疫機(jī)制研究。
鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的使用方法:
1、首先將試劑盒恢復(fù)至室溫(約30分鐘),然后用純水配制清洗液至工作濃度(一份濃縮清洗液加19份純水)。
2、取出酶標(biāo)簽板。每個(gè)試樣需要6個(gè)孔,陽性對照為6個(gè)孔。將多余的儲(chǔ)存在自封袋中,并記住添加干燥劑。
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清液50μL加入酶標(biāo)微孔板,每個(gè)樣品6個(gè)孔,每個(gè)陽性對照品50個(gè)孔然后再添加50μL每孔樣品稀釋劑。貼上封板膜,在37℃孵育30分鐘。
4、丟棄紙板中的液體,拍干紙板,或在經(jīng)過五次洗滌后仍無法去除纖維的吸水材料上機(jī)洗五次。然后將六種酶標(biāo)記的二級(jí)抗體中的每一種添加到每個(gè)樣品的六個(gè)微孔中,μl。對于一般陽性對照的六個(gè)孔,情況也是一樣的。在加樣圖或酶標(biāo)板上標(biāo)記。貼上封板膜,在37℃孵育30分鐘。
5、吸收并丟棄板中的液體。將紙板清洗5次后,將其拍干或在不去除纖維的吸水材料上機(jī)洗5次。在每個(gè)孔中分別加入50份顯影劑A和50份顯影劑B,μl。更換一層新的密封膜,然后在37℃下貼板顯影20分鐘。
6、該試劑盒的特異性好。通常,可以用肉眼觀察結(jié)果,通過觀察與藍(lán)孔對應(yīng)的酶標(biāo)記的二級(jí)抗體,可以知道該樣本的Ig類或亞類。反應(yīng)終止溶液反應(yīng)終止后,使用微孔板分析儀測量450nm處的波長和630nm處的參考波長,以獲得雙波長測量結(jié)果。參考高值孔對應(yīng)酶標(biāo)簽的二級(jí)抗體,了解該樣本的Ig類或亞類。陽性對照0D小于0.5。實(shí)驗(yàn)無效,需要重新進(jìn)行。
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