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簡單分析鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的背景技術(shù)

 更新時間:2019-04-15    點(diǎn)擊量:890
     鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體是由曲霉屬和青霉屬的某些菌種產(chǎn)生的一種常見真菌毒素,常污染谷物及其制品,具有腎毒性、肝毒性等。本抗體為鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體,該抗體可運(yùn)用于ELISA、膠體金、免疫親和柱層析等免疫檢測。
鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的背景技術(shù):
    鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體包括7種結(jié)構(gòu)類似的化合物,是由多種生長在糧食(小麥、玉米、大麥、燕麥、黑麥、大米和黍類等)、花生、蔬菜(豆類)等農(nóng)作物上的曲霉和青霉產(chǎn)生的。其中赭曲霉毒素A(OTA)的毒性大,在霉變谷物、飼料等中常見。OTA主要經(jīng)胃腸道吸收,在人體血液中半衰期長達(dá)840h,有很強(qiáng)的肝毒性和腎毒性,是引起巴爾干腎炎的主要原因,除此,其還具有致畸和致癌作用,與上尿路腫瘤發(fā)生率的增加密切相關(guān)。鑒于OTA的腎臟毒性、肝臟毒性、免疫毒性和致畸性,其被衛(wèi)生組織定為2B類可疑人類致癌物。且OTA有很高的化學(xué)穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性,因此OTA污染問題引起了國內(nèi)外的廣泛關(guān)注。為此,很多組織都對食品及飼料中的OTA含量進(jìn)行了嚴(yán)格限定,如規(guī)定谷類等食品中OTA高濃度為5y g/kg,糧農(nóng)組織/衛(wèi)生組織聯(lián)合食品添加劑委員會暫定人每日對OTA大耐受量為0.17ng/(kg.d)。而我國又屬于小農(nóng)戶分散型的種植模式,因此鑒于OTA的廣泛發(fā)生性,加強(qiáng)對食品及農(nóng)產(chǎn)品中OTA的檢測尤其是快速檢測,對保障我國食品安全消費(fèi)具有重要意義。
    現(xiàn)有的對赭曲霉毒素的檢測方法包括薄層層析法、精密儀器分析法和免疫學(xué)分析法。薄層層析法對赭曲霉毒素A進(jìn)行檢測時,不需要特殊的儀器設(shè)備,一般實(shí)驗室都可進(jìn)行,但試劑用量大、操作繁瑣、其它組分干擾嚴(yán)重、準(zhǔn)確性差,不能準(zhǔn)確定量,且對實(shí)驗人員和周圍環(huán)境污染危害較大,不適于現(xiàn)場快速檢測。精密儀器分析法主要包括液相色譜法和液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用方法,其靈敏度高,準(zhǔn)確性好,但儀器昂貴,要求赭曲霉毒素A樣品的純化程度高,樣品前處理過程繁瑣,耗時長,對實(shí)驗環(huán)境要求高,難以實(shí)現(xiàn)快速檢測。
    近些年發(fā)展起來的免疫分析技術(shù)克服了前兩者的缺點(diǎn),具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、樣品前處理簡單、成本低、 對實(shí)驗人員和周圍環(huán)境的污染危害小、適于現(xiàn)場批量檢測等優(yōu)點(diǎn)。免疫分析是利用抗原和抗體的特異性的結(jié)合反應(yīng)和抗體、抗原上的標(biāo)記物的生物、物理或化學(xué)放大作用來對超微量殘留物進(jìn)行定性、定量檢測,其中,抗體作為免疫反應(yīng)的核心試劑,為了建立針對鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的免疫學(xué)檢測技術(shù),必須先制得靈敏度高、特異性好的抗赭曲霉毒素A的抗體。
 
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